De chemische synthese en immunologische evaluatie van nieuwe generatie multivalente anti-kanker vaccins op foundation van een Tn -antigeen analoog
Tumorgeassocieerde koolhydraatantigenen (TACA’s), zoals het Tn-antigeen, zijn naar voren gekomen als belangrijke doelen voor de ontwikkeling van synthetische antikankervaccins. De inductie van krachtige en functionele immuunresponsen was echter een uitdaging en in de meeste gevallen niet succesvol. Hierin rapporteren we het ontwerp, de synthese en de immunologische evaluatie bij muizen van op Tn gebaseerde vaccinkandidaten met multivalente presentatie van het Tn-antigeen (tot 16 kopieën), zowel in zijn natieve serine-linked show (Tn-Ser) en als een oxime -gebonden Tn-analoog (Tn-oxim).
De prototypes van het vaccin met hoge valentie werden gesynthetiseerd by way of een convergente assemblage in een laat stadium (Tn-Ser-construct) en een veelzijdige divergente strategie (Tn-oxime-analoog), met behulp van chemoselectieve klik-type chemie. Het hexadecavalente Tn-oximconstruct induceerde robuuste, Tn-specifieke humorale en CD4 + /CD8 + cellulaire reacties, met antilichamen die in staat zijn om het Tn-antigeen op het MCF7-kankerceloppervlak te binden . De superieure synthetische toegankelijkheid en immunologische eigenschappen van dit prototype van een volledig synthetisch vaccin maken het een aantrekkelijke kandidaat voor verdere vooruitgang naar veilige en effectieve synthetische vaccins tegen kanker.
robegids
Rat Anti-Mouse Pan-endothelial Cell Antigen (MECA-32) Monoclonal antibody, clone MECA-32
Description: Harvested bacteria are washed and detergent solubilized to produce a cytoplasmic extract enriched with lipoproteins and outer surface proteins (OSPs). The antigen is presented in phosphate buffered saline containing 1 % n-octyl-β-D-glucopyranoside.
Description: Harvested bacteria are washed and detergent solubilized to produce a cytoplasmic extract enriched with lipoproteins and outer surface proteins (OSPs). The antigen is presented in phosphate buffered saline containing 1 % n-octyl-β-D-glucopyranoside.
Description: Harvested bacteria are washed and detergent solubilized to produce a cytoplasmic extract enriched with lipoproteins and outer surface proteins (OSPs). The antigen is presented in phosphate buffered saline containing 1 % n-octyl-β-D-glucopyranoside.
Description: Harvested bacteria are washed and detergent solubilized to produce a cytoplasmic extract enriched with lipoproteins and outer surface proteins (OSPs). The antigen is presented in phosphate buffered saline containing 1 % n-octyl-β-D-glucopyranoside.
Description: Candida albicans is grown on solid medium, washed, disrupted and subjected to an extraction process. The antigen consists of cytoplasmic and cell wall components.
Description: Candida albicans is grown on solid medium, washed, disrupted and subjected to an extraction process. The antigen consists of cytoplasmic and cell wall components.
Description: Bacteria are cultured on solid medium, harvested, washed and solubilised. The antigen is partially purified by detergent extraction and centrifugation.
Description: Bacteria are cultured on solid medium, harvested, washed and solubilised. The antigen is partially purified by detergent extraction and centrifugation.
Description: Campylobacter jejuni is cultured on solid medium. This antigen is a partially purified detergent extract of the membrane fraction. The main component is an outer membrane protein, approximately 45 kDa in SDS-PAGE.
Description: Campylobacter jejuni is cultured on solid medium. This antigen is a partially purified detergent extract of the membrane fraction. The main component is an outer membrane protein, approximately 45 kDa in SDS-PAGE.
Description: Proprietary recombinant antigen expressed in E. coli and purified by chromatography. Individually pooled antigens shown to react with QC serum panel (multiple negative, borderline and positive sera) within defined reactivity range in Coxsackie-/Echovirus
Description: Proprietary recombinant antigen expressed in E. coli and purified by chromatography. Individually pooled antigens shown to react with QC serum panel (multiple negative, borderline and positive sera) within defined reactivity range in Coxsackie-/Echovirus
Description: Proprietary recombinant antigen expressed in E. coli and purified by chromatography. Individually pooled antigens shown to react with QC serum panel (multiple negative, borderline and positive sera) within defined reactivity range in Coxsackie-/Echovirus IgA, IgG and IgM ELISA.
Description: Proprietary recombinant antigen expressed in E. coli and purified by chromatography. Individually pooled antigens shown to react with QC serum panel (multiple negative, borderline and positive sera) within defined reactivity range in Coxsackie-/Echovirus IgA, IgG and IgM ELISA.
Description: Yersinia pestis V antigen (LcrV antigen, capsule protein fraction 1, type III secretion system needle tip protein). The protein is produced as an N-terminal GST fusion, with GST being cleaved by thrombin and is not present in the final product.
Description: Yersinia pestis V antigen (LcrV antigen, capsule protein fraction 1, type III secretion system needle tip protein). The protein is produced as an N-terminal GST fusion, with GST being cleaved by thrombin and is not present in the final product.
Description: Recombinant Ross River virus antigen expressed in HEK293 cells as virus-like particles and purified by sucrose density gradients and precipitation. Virus-like particles were then solubilized in PBS containing 0.2% SDS to prevent aggregation of particles. The preparation is not particulate. Antigens in the preparation include Envelope proteins 1 and 2 and Nucleoprotein.
Description: Recombinant Ross River virus antigen expressed in HEK293 cells as virus-like particles and purified by sucrose density gradients and precipitation. Virus-like particles were then solubilized in PBS containing 0.2% SDS to prevent aggregation of particles. The preparation is not particulate. Antigens in the preparation include Envelope proteins 1 and 2 and Nucleoprotein.
Description: Mouse monoclonal antibody specific for Giardia lamblia trophoziote protein (clone G18)
×
Antigeenmatching voor transfusieondersteuning bij Braziliaanse vrouwelijke patiënten met sikkelcelziekte om RBC-allo-immunisatie te verminderen
Achtergrond: Allo-immunisatie van rode bloedcellen (RBC) is een complicatie van patiënten met sikkelcelziekte (SCD) en heeft een grotere impression op de zwangerschap, wat leidt tot een risico op hemolytische ziekte van de pasgeborene en een verminderde beschikbaarheid van bloed voor zwangere vrouwen. Deze studie stelde voor om antigeen-matchende transfusieprotocollen te evalueren, gericht op het verminderen van RBC-allo-immunisatie bij Braziliaanse vrouwelijke patiënten met SCD.
Methoden: Monsters van vrouwelijke patiënten met SCD (153) en zelfverklaarde Afro-Braziliaanse donoren (307) werden gegenotypeerd voor RBC-antigenen en RH-varianten werden onderzocht. De transfusiebehoeften van patiënten gedurende een periode van 1 jaar en het aantal compatibele donoren werden beoordeeld met behulp van drie antigeen-matchende transfusieprotocollen: profylactische CEK-antigeen-gematchte RBC’s, profylactische verlengde antigeen-gematchte RBC’s en extended-matched rode bloedcellen (RBC’s) alleen voor allo-geïmmuniseerde patiënten. Daarnaast is moleculaire matching van RH voorgesteld voor patiënten die drager zijn van variant RHCE.
Resultaten: Het verstrekken van CEK-antigeen-gematchte donoren zou mogelijk zijn geweest in 92,4% van de transfusiegebeurtenissen, terwijl het verstrekken van profylactische verlengde antigeen-gematchte RBC’s 88,7% van de transfusiegebeurtenissen zou dekken. Uitgebreide antigeenmatching voor allo-geïmmuniseerde patiënten zou in 99% van de gevallen efficiënt zijn. De aanwezigheid van partiële D bij 10 patiënten verhoogde de behoefte aan D-negatieve donoren. Compatibele donoren zouden voldoende kunnen zijn voor vier van de vijf patiënten met veranderde RHCE-genotypen in beide allelen.
Conclusie: Bij Brazilianen maakt het screenen van donoren van Afrikaanse afkomst de implementatie mogelijk van profylactische CEK en uitgebreide antigeen-matchende transfusieprotocollen voor vrouwelijke patiënten met SCD om RBC-allo-immunisatie te verminderen; de toevoer van compatibel bloed kan echter worden aangetast voor patiënten met Rh-varianten.
Twee menselijke antilichamen tegen een meningokokken-serogroep B- vaccinantigeen versterken de binding van complementfactor H door de issue H-bindingsplaats te stabiliseren
Microbiële pathogenen binden aan regulerende eiwitten van het gastheercomplement om het immuunsysteem te ontwijken. De bacteriële pathogeen Neisseria meningitidis, of meningococcus, bindt verschillende complementregulatoren, waaronder humane issue H (FH). FH-bindend eiwit (FHbp) is een element van twee goedgekeurde meningokokkenvaccins en bij muizen wekt FHbp antilichamen op die de binding van FH aan FHbp remmen, die het bacteriële ontwijkingsmechanisme verslaan.
Mensen die met FHbp zijn gevaccineerd, ontwikkelen echter antilichamen die de binding van FH aan de bacteriën versterken, wat de effectiviteit van de vaccins zou kunnen beperken. In de huidige studie laten we zien dat twee door vaccins opgewekte antilichaamfragmenten (Fabs) geïsoleerd uit verschillende menselijke proefpersonen de binding van complement FH aan meningokokken FHbp door ELISA verhogen . De twee Fab’s hebben verschillende effecten op de kinetiek van FH-binding aan geïmmobiliseerd FHbp, zoals gemeten door oppervlakteplasmonresonantie. De röntgenkristalstructuren met een resolutie van 1,7 en 2,zero A van de Fab’s in complexen met FHbp illustreren dat de twee Fab’s binden aan vergelijkbare epitopen op het amino-terminale domein van FHbp, grenzend aan de FH-bindingsplaats.
Superpositiemodellen van ternaire complexen van elk Fab met FHbp en FH laten zien dat er waarschijnlijk minimaal contact is tussen de Fabs en FH. Gezamenlijk onthullen de structuren dat de Fab’s de binding van FH aan FHbp versterken door de conformaties en mobiliteiten van twee lussen naast de FH-bindingsplaats van FHbp te veranderen. Bovendien definieert de structuur met een resolutie van 1,5 A van een van de geïsoleerde Fab’s de structurele herschikkingen die zijn geassocieerd met binding aan FHbp. De FH-versterkende menselijke Fabs, die worden weerspiegeld in de menselijke polyklonale antilichaamreacties, hebben belangrijke implicaties voor het afstemmen van de effectiviteit van op FHbp gebaseerde vaccins.
Microfluïdische sortering maakt de isolatie mogelijk van een intact cellulair paarcomplex van CD8+ T-cellen en antigeenpresenterende cellen op een verwante antigeenherkenningsafhankelijke manier
Adaptieve immuunresponsen beginnen met verwante antigeenpresentatie-afhankelijke specifieke interactie tussen T-cellen en antigeenpresenterende cellen. Er zijn echter beperkte rapporten over de isolatie en analyse van deze cellulaire complexen van T-cel-antigeen-presenterende cellen (T/APC). In deze studie hebben we met succes intacte antigeen-specifieke cellulaire complexen van CD8+ T/APC geïsoleerd door gebruik te maken van een microfluïdische celsorteerder.
Met behulp van ovalbumine (OVA) modelantigeen en OT-I-afgeleide OVA-specifieke CD8+ T-cellen , analyseerden we de vorming van antigeen-specifieke en antigeen-niet-specifieke T/APC cellulaire complexen en onthulden dat de antigeen-specifieke T/APC cellulaire complicated zeer stabiel was dan het niet-specifieke, en dat het intacte antigeenspecifieke T/APC-complex zowel kan worden teruggevonden als verrijkt met behulp van een microfluïdische sorteerder, maar geen conventionele celsorteerder. Het verkregen enkele T/APC-cellulaire complicated kan verder worden geanalyseerd op de sequenties van de Vα- en Vβ-genen van de T-celreceptorevenals gelijktijdig verwante antigeeninformatie. Deze resultaten suggereerden dat deze benadering kan worden toegepast op andere antigeen- en CD8+-T-cellen van muizen en mogelijk die van mensen. Wij zijn van mening dat deze methode voor het sorteren van microfluïdica van het T/APC-complex nuttige informatie zal opleveren voor toekomstig T-celimmunologisch onderzoek.
Van tumor afgeleide autofagosomen (DRibbles) activeren menselijke B-cellen om efficiënte antigeenspecifieke T-celreacties op menselijk geheugen te induceren
We hebben gemeld dat van tumor afgeleide autofagosomen (DRibbles) efficiënte dragers waren van tumorantigenen en dat DRibbles-antigenen aanwezig zouden kunnen zijn door DRibbles-geactiveerde B-cellen om het impact en naïeve T-cellen bij muizen te stimuleren. Het impact van DRibbles op menselijke B-cellen blijft echter onduidelijk. Hierin vonden we dat DRibbles ook efficiënt proliferatie en activering van menselijke B-cellen kan induceren en kan leiden tot de productie van chemokinen, cytokinen en hematopoëtische groeifactoren.
We hebben verder aangetoond dat menselijke B-cellen DRibbles effectief kunnen fagocyteren en DRibbles-antigenen kruislings presenteren om antigeenspecifieke geheugen-T-cellen te stimuleren. Verder vonden we dat membraangebonden groep B1 met hoge mobiliteit (HMGB1) op DRibbles cruciaal was voor het induceren van activering van menselijke B-cellen. Daarom leveren deze bevindingen verder bewijs om de klinische toepassing van B-DRibbles-vaccins te bevorderen.
