De chemische synthese en immunologische evaluatie van nieuwe generatie multivalente anti-kanker vaccins op foundation van een Tn -antigeen analoog
Tumorgeassocieerde koolhydraatantigenen (TACA’s), zoals het Tn-antigeen, zijn naar voren gekomen als belangrijke doelen voor de ontwikkeling van synthetische antikankervaccins. De inductie van krachtige en functionele immuunresponsen was echter een uitdaging en in de meeste gevallen niet succesvol. Hierin rapporteren we het ontwerp, de synthese en de immunologische evaluatie bij muizen van op Tn gebaseerde vaccinkandidaten met multivalente presentatie van het Tn-antigeen (tot 16 kopieën), zowel in zijn natieve serine-linked show (Tn-Ser) en als een oxime -gebonden Tn-analoog (Tn-oxim).
De prototypes van het vaccin met hoge valentie werden gesynthetiseerd by way of een convergente assemblage in een laat stadium (Tn-Ser-construct) en een veelzijdige divergente strategie (Tn-oxime-analoog), met behulp van chemoselectieve klik-type chemie. Het hexadecavalente Tn-oximconstruct induceerde robuuste, Tn-specifieke humorale en CD4 + /CD8 + cellulaire reacties, met antilichamen die in staat zijn om het Tn-antigeen op het MCF7-kankerceloppervlak te binden . De superieure synthetische toegankelijkheid en immunologische eigenschappen van dit prototype van een volledig synthetisch vaccin maken het een aantrekkelijke kandidaat voor verdere vooruitgang naar veilige en effectieve synthetische vaccins tegen kanker.
Description: A competitive ELISA for quantitative measurement of Mouse Anti Melanoma associated antigen in samples from blood, plasma, serum, cell culture supernatant and other biological fluids. This is a high quality ELISA kit developped for optimal performance with samples from the particular species.
Description: A competitive ELISA for quantitative measurement of Mouse Anti Melanoma associated antigen in samples from blood, plasma, serum, cell culture supernatant and other biological fluids. This is a high quality ELISA kit developped for optimal performance with samples from the particular species.
Description: A competitive ELISA for quantitative measurement of Mouse Anti Melanoma associated antigen in samples from blood, plasma, serum, cell culture supernatant and other biological fluids. This is a high quality ELISA kit developped for optimal performance with samples from the particular species.
Description: A competitive ELISA for quantitative measurement of Mouse Anti soluble liver antigen in samples from blood, plasma, serum, cell culture supernatant and other biological fluids. This is a high quality ELISA kit developped for optimal performance with samples from the particular species.
Description: A competitive ELISA for quantitative measurement of Mouse Anti soluble liver antigen in samples from blood, plasma, serum, cell culture supernatant and other biological fluids. This is a high quality ELISA kit developped for optimal performance with samples from the particular species.
Description: A competitive ELISA for quantitative measurement of Mouse Anti soluble liver antigen in samples from blood, plasma, serum, cell culture supernatant and other biological fluids. This is a high quality ELISA kit developped for optimal performance with samples from the particular species.
Description: Carcinoembryonic antigen is a protein encoded by the CEACAM5 gene which is approximately 76,7 kDa. Carcinoembryonic antigen is localised to the cell membrane. It is involved in the metabolism of proteins and hematopoietic stem cell differentiation pathways and lineage-specific markers. It is a cell surface glycoprotein that plays a role in cell adhesion and in intracellular signalling. It may also regulate differentiation, apoptosis, and cell polarity and is used as a clinical biomarker for gastrointestinal cancers. Carcinoembryonic antigen is expressed in the intestine, liver, saliva, stomach and lung. Mutations in the CEACAM5 gene may be involved in urachal cancer. STJ96963 was developed from clone 10E1 and was affinity-purified from mouse ascites by affinity-chromatography using specific immunogen. This primary antibody detects endogenous Carcinoembryonic antigen proteins.
Description: A competitive ELISA for quantitative measurement of Mouse Anti paraneoplastic Ma antigen 2 antibody in samples from blood, plasma, serum, cell culture supernatant and other biological fluids. This is a high quality ELISA kit developped for optimal performance with samples from the particular species.
×
Antigeenmatching voor transfusieondersteuning bij Braziliaanse vrouwelijke patiënten met sikkelcelziekte om RBC-allo-immunisatie te verminderen
Achtergrond: Allo-immunisatie van rode bloedcellen (RBC) is een complicatie van patiënten met sikkelcelziekte (SCD) en heeft een grotere impression op de zwangerschap, wat leidt tot een risico op hemolytische ziekte van de pasgeborene en een verminderde beschikbaarheid van bloed voor zwangere vrouwen. Deze studie stelde voor om antigeen-matchende transfusieprotocollen te evalueren, gericht op het verminderen van RBC-allo-immunisatie bij Braziliaanse vrouwelijke patiënten met SCD.
Methoden: Monsters van vrouwelijke patiënten met SCD (153) en zelfverklaarde Afro-Braziliaanse donoren (307) werden gegenotypeerd voor RBC-antigenen en RH-varianten werden onderzocht. De transfusiebehoeften van patiënten gedurende een periode van 1 jaar en het aantal compatibele donoren werden beoordeeld met behulp van drie antigeen-matchende transfusieprotocollen: profylactische CEK-antigeen-gematchte RBC’s, profylactische verlengde antigeen-gematchte RBC’s en extended-matched rode bloedcellen (RBC’s) alleen voor allo-geïmmuniseerde patiënten. Daarnaast is moleculaire matching van RH voorgesteld voor patiënten die drager zijn van variant RHCE.
Resultaten: Het verstrekken van CEK-antigeen-gematchte donoren zou mogelijk zijn geweest in 92,4% van de transfusiegebeurtenissen, terwijl het verstrekken van profylactische verlengde antigeen-gematchte RBC’s 88,7% van de transfusiegebeurtenissen zou dekken. Uitgebreide antigeenmatching voor allo-geïmmuniseerde patiënten zou in 99% van de gevallen efficiënt zijn. De aanwezigheid van partiële D bij 10 patiënten verhoogde de behoefte aan D-negatieve donoren. Compatibele donoren zouden voldoende kunnen zijn voor vier van de vijf patiënten met veranderde RHCE-genotypen in beide allelen.
Conclusie: Bij Brazilianen maakt het screenen van donoren van Afrikaanse afkomst de implementatie mogelijk van profylactische CEK en uitgebreide antigeen-matchende transfusieprotocollen voor vrouwelijke patiënten met SCD om RBC-allo-immunisatie te verminderen; de toevoer van compatibel bloed kan echter worden aangetast voor patiënten met Rh-varianten.
Twee menselijke antilichamen tegen een meningokokken-serogroep B- vaccinantigeen versterken de binding van complementfactor H door de issue H-bindingsplaats te stabiliseren
Microbiële pathogenen binden aan regulerende eiwitten van het gastheercomplement om het immuunsysteem te ontwijken. De bacteriële pathogeen Neisseria meningitidis, of meningococcus, bindt verschillende complementregulatoren, waaronder humane issue H (FH). FH-bindend eiwit (FHbp) is een element van twee goedgekeurde meningokokkenvaccins en bij muizen wekt FHbp antilichamen op die de binding van FH aan FHbp remmen, die het bacteriële ontwijkingsmechanisme verslaan.
Mensen die met FHbp zijn gevaccineerd, ontwikkelen echter antilichamen die de binding van FH aan de bacteriën versterken, wat de effectiviteit van de vaccins zou kunnen beperken. In de huidige studie laten we zien dat twee door vaccins opgewekte antilichaamfragmenten (Fabs) geïsoleerd uit verschillende menselijke proefpersonen de binding van complement FH aan meningokokken FHbp door ELISA verhogen . De twee Fab’s hebben verschillende effecten op de kinetiek van FH-binding aan geïmmobiliseerd FHbp, zoals gemeten door oppervlakteplasmonresonantie. De röntgenkristalstructuren met een resolutie van 1,7 en 2,zero A van de Fab’s in complexen met FHbp illustreren dat de twee Fab’s binden aan vergelijkbare epitopen op het amino-terminale domein van FHbp, grenzend aan de FH-bindingsplaats.
Superpositiemodellen van ternaire complexen van elk Fab met FHbp en FH laten zien dat er waarschijnlijk minimaal contact is tussen de Fabs en FH. Gezamenlijk onthullen de structuren dat de Fab’s de binding van FH aan FHbp versterken door de conformaties en mobiliteiten van twee lussen naast de FH-bindingsplaats van FHbp te veranderen. Bovendien definieert de structuur met een resolutie van 1,5 A van een van de geïsoleerde Fab’s de structurele herschikkingen die zijn geassocieerd met binding aan FHbp. De FH-versterkende menselijke Fabs, die worden weerspiegeld in de menselijke polyklonale antilichaamreacties, hebben belangrijke implicaties voor het afstemmen van de effectiviteit van op FHbp gebaseerde vaccins.
Microfluïdische sortering maakt de isolatie mogelijk van een intact cellulair paarcomplex van CD8+ T-cellen en antigeenpresenterende cellen op een verwante antigeenherkenningsafhankelijke manier
Adaptieve immuunresponsen beginnen met verwante antigeenpresentatie-afhankelijke specifieke interactie tussen T-cellen en antigeenpresenterende cellen. Er zijn echter beperkte rapporten over de isolatie en analyse van deze cellulaire complexen van T-cel-antigeen-presenterende cellen (T/APC). In deze studie hebben we met succes intacte antigeen-specifieke cellulaire complexen van CD8+ T/APC geïsoleerd door gebruik te maken van een microfluïdische celsorteerder.
Met behulp van ovalbumine (OVA) modelantigeen en OT-I-afgeleide OVA-specifieke CD8+ T-cellen , analyseerden we de vorming van antigeen-specifieke en antigeen-niet-specifieke T/APC cellulaire complexen en onthulden dat de antigeen-specifieke T/APC cellulaire complicated zeer stabiel was dan het niet-specifieke, en dat het intacte antigeenspecifieke T/APC-complex zowel kan worden teruggevonden als verrijkt met behulp van een microfluïdische sorteerder, maar geen conventionele celsorteerder. Het verkregen enkele T/APC-cellulaire complicated kan verder worden geanalyseerd op de sequenties van de Vα- en Vβ-genen van de T-celreceptorevenals gelijktijdig verwante antigeeninformatie. Deze resultaten suggereerden dat deze benadering kan worden toegepast op andere antigeen- en CD8+-T-cellen van muizen en mogelijk die van mensen. Wij zijn van mening dat deze methode voor het sorteren van microfluïdica van het T/APC-complex nuttige informatie zal opleveren voor toekomstig T-celimmunologisch onderzoek.
Van tumor afgeleide autofagosomen (DRibbles) activeren menselijke B-cellen om efficiënte antigeenspecifieke T-celreacties op menselijk geheugen te induceren
We hebben gemeld dat van tumor afgeleide autofagosomen (DRibbles) efficiënte dragers waren van tumorantigenen en dat DRibbles-antigenen aanwezig zouden kunnen zijn door DRibbles-geactiveerde B-cellen om het impact en naïeve T-cellen bij muizen te stimuleren. Het impact van DRibbles op menselijke B-cellen blijft echter onduidelijk. Hierin vonden we dat DRibbles ook efficiënt proliferatie en activering van menselijke B-cellen kan induceren en kan leiden tot de productie van chemokinen, cytokinen en hematopoëtische groeifactoren.
We hebben verder aangetoond dat menselijke B-cellen DRibbles effectief kunnen fagocyteren en DRibbles-antigenen kruislings presenteren om antigeenspecifieke geheugen-T-cellen te stimuleren. Verder vonden we dat membraangebonden groep B1 met hoge mobiliteit (HMGB1) op DRibbles cruciaal was voor het induceren van activering van menselijke B-cellen. Daarom leveren deze bevindingen verder bewijs om de klinische toepassing van B-DRibbles-vaccins te bevorderen.
